Auramin-Rodamin Boyama Yöntemi Nedir?

Tanım

Mikobakterilerin tanısı için rutin olarak en sık karbol fuksinli (Erlich Ziehl Neelsen- EZN) boyama kullanılmakla birlikte, daha duyarlı ve hazırlanan preparatın daha hızlı taranmasını sağlayan florokrom boyalar da kullanılabilir. Bu boyama yöntemlerinde, daha küçük bir büyütme ile daha geniş bir alan taranabilir ve preparatın taranması için gereken zaman azaltılabilir. Bu nedenle özellikle zaman problemi olan ve fazla sayıda hasta örneğinin işlendiği laboratuvarlarda, florokrom boyama yöntemleri tercih edilebilir. Florokrom boyamada ana ilke fenollü fuksin yerine floresan boyaların kullanılmasıdır. Floresan boyalar, mikobakterilerin lipitten zengin hücre duvarına bağlanarak, görünür hale gelmesini sağlar. Bazı kriterlere göre, farklı floresan boyama yöntemleri uygulanabilir. AR boyası auramin-O ve rhodamin-B’ nin bir karışımıdır ve kanserojendir.

Yöntem

1. Bu yöntemle auramin-O çözeltisi karbol fuksin yerine kullanılır.
2. Preparat hazırlanır, kurutulur ve tespit edilir.
3. Auramin-O çözeltisi ile 15 dakika boyanır.
4. Su ile yıkanır ve asit – alkolde (alkol % 75’lik + 0.5 NaCl + % 0.5 HCl) dekolore edilir (5 dakika).
5. Su ile yıkanır ve KMnO4 (1/1000) solüsyonu eklenir ve 30 saniye beklenir.
6. Su ile yıkanır, havada kurutulur ve immersiyonla muayene edilir.

ARB pozitif bakteriler karanlık bir zeminde sarı-turuncu parlak, ince, kıvrık, içi tanecikli floresan veren bakteriler olarak görülür.

Kaynak: https://www.biyologlar.com/auramin-rhodamin-ile-boyama-yontemi

Editör: Molekülce Kaynak